10.12160/j.issn.1672-5190.2022.04.003
猪流行性腹泻病毒S2基因B细胞表位的筛选及其单克隆抗体的制备与鉴定
[目的]应用生物学软件与单克隆抗体技术相结合的方法鉴定PEDV S2基因B细胞表位肽.[方法]利用CLC Sequence viewer 6.8软件及在线数据库IEDB筛选出PEDV S2基因B细胞表位,并人工合成表位肽.将表位肽与钥孔血蓝蛋白(KLH)耦联后作为抗原,免疫雌性BALB/c小鼠,通过ELISA法筛选出抗体效价较高的小鼠进行1次加强免疫,3 d后取脾脏制备脾细胞悬液进行细胞融合.经HAT选择培养基培养筛选有效杂交瘤细胞,采用ELISA法筛选阳性克隆继续进行扩大培养.将部分阳性杂交瘤细胞进行小鼠腹腔注射,并收集腹水.通过ELISA方法分别检测小鼠腹水和单克隆细胞株培养上清液抗体效价,确定最高效价作为后备细胞株.[结果]筛选出B细胞表位肽序列为:MQYVYTPTYYML;免疫多肽抗原后融合前血清抗体效价达到1:2000;BALB/c小鼠腹水及单克隆细胞株培养物上清液ELISA检测结果显示抗体效价达到1:4000.[结论]筛选出了PEDV S2基因B细胞表位,为PEDV表位肽疫苗载体构建研究提供参考.
猪流行性腹泻病毒、S2基因、B细胞表位、单克隆抗体
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S858.28;S852.43(动物医学（兽医学）)
农业部农业科学观测实验站项目;广东省畜禽疫病防治研究重点实验室开放课题项目
2022-07-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共5页
14-18
