10.3969/j.issn.1001-4616.2013.02.020
GGPPS基因干扰腺病毒载体的构建及鉴定
构建GGPPS基因干扰腺病毒质粒载体并加以鉴定.根据GGPPS基因序列设计GGPPS干扰序列引物,定向克隆至穿梭载体pshuttle-H1的Bgl Ⅱ和Hind Ⅲ位点,Pme Ⅰ酶切线性化的pShuttle-H1-SiGGPPS干扰质粒,并与腺病毒载体( pAdEasy-1质粒)共同转化E. coli BJ5183感受态细菌,产生重组腺病毒载体.用PacⅠ酶切线性化的回收质粒,转染293A细胞包装腺病毒颗粒,在倒置显微镜下观察细胞CPE,用TCID50法测定病毒颗粒的浓度,并初步观察病毒感染PC12细胞对目的基因的干扰效率.经酶切鉴定、测序证实成功构建GGPPS基因干扰腺病毒载体.包装的腺病毒浓缩悬液滴度为1.995×107 PFU/mL. GGPPS在人中具有保守性,该病毒能在人源的WRL-68细胞中成功表达,并且对GGPPS基因干扰效率达70%以上.
GGPPS基因、干扰、腺病毒
Q29
国家自然科学青年基金31100448;博士点基金2113204120004
2013-09-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共5页
104-107,112
