10.3969/j.issn.1001-4616.2012.03.017
中华补血草ISSR-PCR体系的构建与正交优化
为获得中华补血草ISSR的最佳反应体系,采用正交试验设计,对影响ISSR反应的模板含量、Mg2+浓度、dNTP浓度、Taq酶浓度、扩增程序及退火温度等多种因子进行优化筛选.通过各因子的组合研究,分析非特异性条带的产生原因并进行条件优化,建立了可用于中华补血ISSR - PCR分析的稳定可靠的反应体系:25 μL PCR反应体积,10×Buffer 2.5μL,2 mmol/L MgCl2,dNTP 100 μmol/L,模板DNA为20 ng,Taq聚合酶1.5U,随机引物0.4μmol/L,退火温度52℃～ 58℃.所建立的中华补血草ISSR反应体系具有标记位点清晰、反应系统稳定、检测多态性能力较强、重复性好等特点,可以较好地应用于中华补血草的遗传多样性及物种保护的研究.
中华补血草、ISSR、反应体系、正交优化
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Q946(植物学)
国家自然科学基金31000142;江苏省自然科学基金BK2011421;盐城工学院科研项目基金、盐城工学院博士启动基金XKR2010003
2012-12-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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