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10.3969/j.issn.1001-4616.2006.02.019

Hirulog 18在大肠杆菌中的表达及其生物学活性检测

引用
以化学合成的Hirulog18基因为模板,经PCR扩增、限制性内切酶Xho Ⅰ和Kpn Ⅰ消化,将编码Hirulog18的基因片断插入表达载体pET-32b中编码硫氧化还原蛋白(Trx)基因序列的下游.用重组质粒转化感受态大肠杆菌-BL21(DE3),并用IPTG诱导表达Trx-Hirulog18融合蛋白.复性、肠激酶酶切、Ni-Sepharose和HPLC纯化后,用质谱测定其分子量并进行活性测定.检测结果表明构建的PET-302b/Hirulog18能够在大肠杆菌中高效表达,表达的Hirulog18具有较低的凝血酶抑制活性并能够竞争抑制Angiomax活性.

Hirulog18、克隆、表达、融合蛋白、HPLC、抑制

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Q786(基因工程(遗传工程))

南京大学校科研和教改项目

2006-07-04(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

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南京师大学报(自然科学版)

1001-4616

32-1239/N

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2006,29(2)

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