10.3969/j.issn.1001-1498.2016.03.011
银杏种胚蛋白提取及双向电泳体系的优化
[目的]探索一套适用于银杏种胚蛋白的双向电泳体系，为研究银杏种胚在不同发育阶段的表达差异蛋白提供基础。[方法]分别从蛋白的不同提取方法（直接提取法、酚提取法、Tris-HCl法、Trizol提取法和TCA-丙酮－酚法）、裂解液中的尿素浓度（6 mol·L－1、7 mol·L－1、8 mol·L－1、9 mol·L－1）蛋白上样量（1500μg、1650μg、1800μg）和分离胶浓度（10％、12．5％、15％）四个方面对银杏种胚的蛋白图谱进行分析，筛选出适宜双向电泳的条件。[结果]采用TCA-丙酮－酚法提取银杏种胚蛋白，在裂解液中尿素浓度为8 mol·L－1、上样量为1650μg、分离胶浓度为12．5％的方法，可以获得分辨率较高、背景更加清晰、重复性更好的银杏种胚蛋白质双向电泳图谱。[结论]建立了适合银杏种胚蛋白双向电泳的体系：TCA-丙酮－酚法制备样品，选取尿素浓度为8 mol·L－1的裂解液提取样品粉末全蛋白，蛋白上样量控制为1650μg，第二向分离胶浓度定为12．5％。
银杏、种胚、蛋白质、双向电泳
29
S792.95(森林树种)
国家自然基金面上项目31570621;辽宁省农业科技攻关项目2014207005
2016-07-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共6页
383-388
