10.11855/j.issn.0577-7402.0133.2023.0620
雷帕霉素对劳力型热射病大鼠下丘脑损伤的保护作用及其机制
目的 探讨雷帕霉素(Rapa)对劳力型热射病大鼠下丘脑损伤的保护作用及其机制.方法 80只Wistar雄性大鼠随机分为对照组、Rapa组、劳力型热射病(EHS)组及EHS+Rapa组,每组20只.Rapa组及EHS+Rapa组大鼠分别于建模前连续4 d腹腔注射Rapa(1 mg/kg,1次/d),对照组及EHS组给予同体积生理盐水.将EHS组及EHS+Rapa组大鼠置于温度(39.5±0.3)℃、湿度55%±5%的气候舱中跑步,建立EHS模型;对照组及Rapa组大鼠置于相同室温下,进行与EHS组同等强度的跑步.在模型建立过程中,观察各组大鼠的一般状态,测量核心温度并绘制大鼠生存曲线(n=11).EHS组及EHS+Rapa组大鼠于入舱80 min后,从舱中取中,并观察300 min.对各组大鼠实施麻醉,取腹主动脉血及下丘脑等组织,HE及尼氏染色观察下丘脑的组织病理学改变;免疫荧光法测定神经元凋亡情况;Western blotting法检测大鼠下丘脑组织中哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、磷酸化mTOR(pmTOR)、自噬效应蛋白(Beclin-1)、泛素结合蛋白(p62)及自噬标志物微管相关蛋白1轻链3(LC3)的表达,并计算pmTOR/mTOR及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值.采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠血清中神经元特异性烯醇化酶(NSE)、脑活性肽100β蛋白(S100β)、白细胞介素-6(IL-6)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达水平.结果 在入舱后80 min时,与对照组相比,EHS组的核心温度明显升高;与Rapa组相比,EHS+Rapa组的核心温度明显升高(P<0.001).与EHS组相比,EHS+Rapa组大鼠的生存率升高(P<0.01).下丘脑组织HE及尼氏染色显示,EHS组大鼠下丘脑神经元病理损伤更重,而EHS+Rapa组大鼠下丘脑神经元病理损伤较EHS组明显减轻(P<0.001).免疫荧光检测结果显示,EHS组大鼠下丘脑组织中细胞凋亡率较对照组显著增高,而与EHS组相比,EHS+Rapa组大鼠下丘脑组织中细胞凋亡率显著降低(P<0.05).Western blotting结果显示,与对照组相比,EHS组大鼠下丘脑组织中pmTOR/mTOR及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值升高,Beclin-1表达增加,p62表达减少(P<0.01);与EHS组相比,EHS+Rapa组大鼠下丘脑组织中pmTOR/mTOR比值降低,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值升高,Beclin-1的表达增加,p62表达减少(P<0.05).ELISA结果显示,与对照组相比,EHS组血清中NSE、S100β、IL-6及TNF-α的表达水平均增高(P<0.05);与EHS组相比,EHS+Rapa组血清中NSE、S100β、IL-6及TNF-α表达水平均降低(P<0.05).结论 雷帕霉素可减轻劳力型热射病引起的下丘脑损伤,改善脑细胞功能,降低炎性因子水平,减少组织细胞凋亡,可能与其抑制mTOR信号通路、增强下丘脑的自噬水平有关.
中暑、下丘脑、雷帕霉素、自噬
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R58(内分泌腺疾病及代谢病)
军事医学创新工程项目;解放军总医院第八医学中心重点项目;解放军总医院第八医学中心重点项目
2023-09-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共10页
903-912
