10.11855/j.issn.0577-7402.2022.05.0451
紫花前胡苷调控EMT对宫颈癌细胞侵袭迁移的影响及其作用机制
目的 探讨紫花前胡苷(NDK)通过调控上皮-间质转化(EMT)影响宫颈癌细胞侵袭迁移的可能机制,并分析其对miR-324-3P/WNT3a轴的影响.方法 取对数生长期人宫颈癌HeLa细胞,分为4组:空白组(于37℃、5％CO2、饱和湿度培养箱中培养)、miR-324-3P inhibitor组(转染hsa-miR-324-3p inhibitor)、NDK组(加入20 mmol/L浓度的NDK培养)、miR-324-3P inhibitor+NDK组(转染miR-324-3P inhibitor后加入20 mmol/L浓度的NDK培养),均处理48 h.采用Transwell实验检测各组细胞侵袭能力;细胞划痕实验检测各组细胞的迁移能力;qRT-PCR检测各组细胞中miR-324-3P、WNT3a mRNA表达水平;Western blotting检测各组EMT相关标志蛋白E-钙黏素(E-cadherin)、波形蛋白、神经型钙黏蛋白(N-cadherin)、WNT3a、β-catenin蛋白表达水平;双荧光素酶报告基因检测miR-324-3P与WNT3a基因的靶向关系.结果 与空白组比较,miR-324-3P inhibitor组HeLa细胞的穿膜细胞数增多,划痕愈合率增高,miR-324-3P mRNA表达水平下降,WNT3a mRNA表达水平升高,E-cadherin蛋白相对表达量降低,波形蛋白、N-cadherin、WNT3a和β-catenin蛋白相对表达量升高(P<0.05);而NDK组、miR-324-3P inhibitor+NDK组HeLa细胞的穿膜细胞数减少,划痕愈合率降低,miR-324-3P mRNA表达水平升高,WNT3a mRNA表达水平降低,E-cadherin蛋白相对表达量升高,波形蛋白、N-cadherin、WNT3a和β-catenin蛋白相对表达量降低(P<0.05);且NDK组上述各指标均低于miR-324-3P inhibitor+NDK组.双荧光素酶报告基因检测结果显示,miR-324-3P mimic可降低WNT3a WT荧光素酶活性(P<0.05),但不影响WNT3a mut荧光素酶活性(P>0.05).结论 NDK可通过调控EMT抑制宫颈癌细胞的侵袭及迁移,其作用机制可能与调节miR-324-3P/WNT3a轴有关.
紫花前胡苷、宫颈癌、细胞侵袭、细胞迁移、上皮-间质转化、miR-324-3P/WNT3a轴
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R735.3(肿瘤学)
河南省科技发展计划182102311175
2022-07-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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