10.11855/j.issn.0577-7402.2019.12.04
原花青素B2通过AKT-FoxO3拮抗脂质诱导的小鼠肝细胞衰老研究
目的 研究原花青素B2(PCB2)对小鼠肝细胞衰老的调控作用,探讨其可能的分子机制.方法 将小鼠胚胎肝细胞株BNL CL.2以梯度浓度棕榈酸(PA)及PCB2处理后,采用噻唑蓝(MTT)检测肝细胞活力,确定PA及PCB2最适浓度.将BNL CL.2细胞分为对照组、PA组和PCB2组,其中PA组用于建立肝细胞衰老模型,PCB2组用最适浓度的PCB2和PA共同作用于细胞.以β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色检测细胞衰老情况,反转录实时定量PCR(RT-qPCR)检测细胞周期相关基因表达情况,免疫荧光检测细胞丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶-叉头转录因子3(AKT/FoxO3)通路的蛋白表达情况.结果 MTT筛选得到PA最适浓度为100μmol/L,PCB2为12.5μg/ml,并用于后续实验.SA-β-Gal染色结果显示,PA组染色阳性细胞数较对照组明显增加;经PCB2处理后,染色阳性细胞数较PA组减少,差异有统计学意义(P<0.001).RT-qPCR结果提示,与对照组比较,PA处理后细胞周期相关基因CDK2表达下调,p21表达上调;经PCB2干预后,CDK2表达较PA组增加,p21表达较PA组下降,差异有统计学意义(P<0.05).免疫荧光检测结果显示,与对照组比较,PA处理后AKT表达在胞核中减少,在胞质中增加,FoxO3在胞核中明显增加;与PA组比较,PCB2处理后AKT表达在胞核中增加,在胞质中减少,FoxO3在胞核中明显减少.结论 PCB2对PA诱导的小鼠肝细胞衰老具有明显保护作用,其机制可能是通过AKT/FoxO3信号通路发挥调控作用.
原花青素B2、细胞衰老、AKT、FoxO3
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R966(药理学)
国家自然科学基金;三峡大学学位论文培优基金
2020-03-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共5页
1013-1017
