10.3321/j.issn:0577-7402.2009.03.015
短发夹RNA干扰黏着斑激酶对结肠癌多细胞球氟尿嘧啶敏感性的影响
目的 探讨抑制黏着斑激酶(FAK)在结肠癌HT29细胞中的表达能否提高HT29多细胞球对氟尿嘧啶(5-FU)的敏感性.方法 构建带有短发夹RNA(shRNA)靶向干扰FAK的重组体pGenesil-1-FAK,抑制FAK在HT29中的表达,采用实时定量PCR和Western blotting检测其在单层细胞和多细胞球中的干扰效率.采用血球计数板计数法检测多细胞球在各时间点的增殖速度,流式细胞术检测干扰对5-FU诱导的多细胞球凋亡的影响,CCK-8法检测单层细胞和多细胞球对5-FU的敏感性的变化.结果 用重组体pGenesil-1-FAK靶向干扰FAK能显著抑制单层细胞FAK mRNA,并能抑制单层细胞和多细胞球FAK蛋白的表达.多细胞球的增殖速度并不受FAK shRNA干扰的影响,各组间在各时间点均无显著性差异(P>0.05).流式细胞术结果显示,FAK shR-NA干扰能够使多细胞球的自发凋亡率(16.48%±1.18%)和5-FU诱导的凋亡率(21.50%±2.62%)显著增加(P=0.000、P=0.001),且两者之间差异显著(P=0.003).CCK-8法检测结果显示,FAK shRNA干扰提高了单层细胞和多细胞球对5-FU的敏感性,且两者无显著差异(P>0.05),从而逆转了因三维球体结构产生的多细胞耐药性.结论 FAK靶向RNA干扰虽不影响多细胞球的增殖,但能促进多细胞球凋亡,并增加多细胞球对5-FU的敏感性;FAK可能介导了结肠癌的多细胞耐药.
球形体、细胞、黏着斑激酶、RNA干扰、结肠肿瘤、基因表达、药物筛选试验、抗肿瘤
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R34-33;R735.35(人体生物化学、分子生物学)
重庆市自然科学基金CSTC2007BB5444;重庆邮电大学博士启动基金A2008-65
2009-04-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共4页
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