10.3321/j.issn:0577-7402.2008.04.017
变异胰岛素基因在HepG2细胞系中的表达
目的 了解变异的胰岛素基因(insulin/furin)在HepG2细胞系中表达及活性胰岛素的产生情况.方法 构建含有insulin/furin的表达质粒p(G1RE)3BP-11×furin并转染HepG2细胞,RT-PCR和放射免疫分析法从mRNA和蛋白质水平观察转染后HepG2细胞中insulin/furin的表达和胰岛素的产生情况.结果 Hind Ⅲ和EcoR Ⅴ双酶切验证质粒p(G1RE)3BP-11×furin,切下260bp和4 700bp两个片段,回收260bp片段测序证实为insulin/furin;RT-PCR检测转染后的HepG2细胞有insulin/furin的表达,DNA测序证实为insulin/furin;培养基中可检测到胰岛素.结论 含insulin/furin的真核表达质粒p(G1RE)3BP-11×furin转染HepG2细胞,insulin/furin成功地在HepG2细胞中表达,并产生有生物活性的胰岛素.
变异、基因表达、胰岛素
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R34-33(人体生物化学、分子生物学)
2008-05-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共3页
417-418,424
