10.3321/j.issn:0577-7402.2008.04.008
肿瘤抑制基因XAF1启动子序列中活性IRF-1作用元件的鉴定
目的 在XAF1的转录起始序列中鉴定一具有高度活性的IRF-1作用元件.方法 通过生物信息学分析发现XAF1转录起始处(-30~-38nt)有一潜在的干扰素(IFN)调节因子1结合元件(IRF-E),与同义IRF-E序列同源性达76.2%,命名为IRFE-XAF1.应用凝胶电泳迁移实验(EMSA)检测IRFE-XAF1的核蛋白结合活性,并分别定点突变其核心序列内-34nt和序列旁-28nt,检测突变后XAF1启动子活性变化及对IFN-α作用的影响.结果 EMSA实验发现32P标记的含IRFE-XAF1的双链寡核苷酸DNA探针可与细胞核蛋白结合,且可被IRF-E同义探针阻断,定点突变后结合活性丧失,证实该IRFE-XAF1位点具有与转录因子结合的活性.含该IRFE-XAF1位点的XAF1启动子序列具有启动子活性且可被IFN-α诱导,IRFE-XAF1序列定点突变后启动子活性明显降低,其中-34nt突变后完全消除了IFN-α上调启动子活性的作用.结论 XAF1的转录起始序列具有一高度活性的IRF-E,其序列为-38nt GAAACGAAA-30nt,这一发现提示XAF1是IFN-α诱导肿瘤细胞分化的作用基因.
XAF1、干扰素调节因子-1、点突变
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R34-33(人体生物化学、分子生物学)
全军医药卫生科技计划06MA104
2008-05-27(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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