10.3321/j.issn:0577-7402.2007.07.017
唾液HRP5第17位密码子反义突变对其在毕赤酵母中表达的影响
目的 在毕赤酵母中表达唾液富组蛋白5(HRP5)基因原始序列hrp5及突变序列hrp5'(Lys17→Asn),比较表达量及抗白色念珠菌活性.方法 选用毕赤酵母偏爱密码子,设计3'端互补、5'端带酶切位点的两对引物,PCR合成hrp5和hrp5',克隆至pPICZα-A,转化大肠杆菌,将酶切、测序鉴定的阳性重组质粒pPICZα-A-hrp5和pPICZα-A-hrp5'经Sac I线性化后电击转化GS115,筛选阳性菌落,PCR鉴定,甲醇诱导表达,比较抗菌活性,测定表达量.结果 hrp5及hrp 5'正确整合到GS115基因组中,突变前后表达产物与HRP5标准品活性相当,表达量分别为4μmol/L、5μmol/L.结论 HRP5在毕赤酵母中成功表达,活性区Lys17突变为Asn使表达量提高25%,而对其杀菌活性无影响.
唾液富组蛋白5、念珠菌、白色、基因表达
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R379.4(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
2007-08-13(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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