10.3321/j.issn:0577-7402.2004.09.024
重组毕赤酵母菌高密度表达人源抗-HBs Fab抗体的研究
目的探讨抗-HBs Fab抗体发酵工程菌GS115/Fab的高密度发酵及对发酵产物的纯化与活性鉴定方法.方法采用补料分批培养方法,在5L发酵罐中对发酵工程菌GS115/Fab进行高密度发酵,发酵温度28～30℃,pH值范围为5.0～5.5,溶氧范围20%以上;3次发酵分别于OD600值达到400～450、200～250、300～350时开始诱导,甲醇诱导浓度为0.5%～1%,经96h左右的诱导后终止发酵,对发酵上清进行亲和纯化,并通过ELISA法对纯化产物进行活性鉴定.结果在OD600为300～350时开始诱导有利于发酵过程条件的控制和目的蛋白的表达,目的蛋白表达量为245mg/L.发酵上清通过亲和层析纯化,获得纯度为98%的重组Fab抗体,该抗体经ELISA分析具有较高的HBsAg抗原亲和力及特异性.结论 Fab酵母菌工程菌在5L发酵罐高密度发酵成功,为抗-HBs Fab抗体的产业化生产及临床研究奠定了基础.
抗-HBs Fab抗体、高密度发酵、毕赤酵母菌、亲和层析
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R512.62(传染病)
广东省广州市科技局科技攻关项目99Z01001
2004-10-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共3页
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