羟乙基纤维素中毛细管电泳DNA分离特性研究
本实验以羟乙基纤维素(HEC)为筛分介质,以100~1500 bp DNA ladder为分离对象,系统地研究了直流电场下毛细管电泳时DNA分离特性.论文考察了DNA迁移淌度及分离度随HEC溶液浓度和分子量、毛细管两端电场强度(E)、毛细管有效长度(le)及其内径形状、背景电解液(BGE)温度等因素变化规律.研究发现:(1)当筛分介质HEC浓度高于其阈值浓度c*时,HEC分子量越大,相邻DNA片段之间淌度差越大,HEC浓度越高,其迁移淌度越低;(2)对于相邻的DNA片段,le在一定范围内,其分离度随le增大而线性升高;(3)毛细管有效长度一定时,DNA淌度随毛细管侧面积与截面积之比R增大而升高,分离效率提高;(4) BGE温度升高,DNA在筛分介质中扩散效应增强,迁移淌度变大,相邻DNA片段间分离度减小.根据以上结论,在直流电场下毛细管电泳φ×174-Hirc Ⅱ限制性酶切片段,并实现了其高分离度、快速分离.
毛细管电泳、羟乙基纤维素、DNA
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国家自然科学基金21205078;高等学校博士学科点专项科研基金博导类资助课题20123120110002;上海理工大学教师创新能力建设GDCX-Y-1205;上海市教委科研创新项目13YZ073;上海市科技发展基金10540500700;上海市研究生创新基金No.JWCXSL1202资助项目.本文部分受上海市重点学科项目第三期项目S30502
2013-04-16(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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