基于分子信标荧光纳米探针的李斯特菌DNA均相检测方法
基于分子信标(MB)识别和荧光纳米粒子探针技术,建立了均相体系中李斯特菌目标DNA的高灵敏检测新方法.首先以羊抗人免疫球蛋白(IgG)标记的异硫氰酸荧光素(FITC)为核材料,成功制备了FITC-IgG@SiO2核壳荧光纳米粒子,有效防止了传统方法中采用单一FITC制备纳米颗粒时泄露严重的问题.随后以FITC-IgG@SiO2荧光纳米粒子和纳米金分别标记单核细胞增生李斯特菌序列特异性分子信标探针5'端和3'端,成功构建了单核细胞增生李斯特菌序列特异性分子信标荧光纳米探针.在实验优化条件下,a(令a=F/Fo,F代表MB和目标DNA杂交以后的荧光强度,Fo代表MB完全闭合时的荧光强度)与目标DNA浓度在1~200 pmol/L浓度范围内呈良好的线性关系,检出下限为0.3pmol/L,相对标准偏差为2.6%(50 pmol/L,n=11).将该方法应用于食品样品中单核细胞增生李斯特菌的检测,结果与国标法一致.
FITC-IgG@SiO2荧光纳米粒子、纳米金、分子信标、单核细胞增生李斯特菌、DNA杂交
68
O6(化学)
国家高技术研究发展计划863计划2008AA10Z419;国家自然科学基金20805019;教育部博士点基金新教师计划20070295014;江苏省自然科学基金BK20081603;"111"引智计划111 project-B07029;教育部创新团队计划PCSIRT0627
2010-06-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
909-916