10.16085/j.issn.1000-6613.2017-1287
环氧化物水解酶PvEH3的表达及手性邻二醇的合成
基于环氧化物水解酶(EHs)一级结构的计算机辅助分析,以菜豆(Phaseolus vulgaris)总RNA为模板,采用逆转录PCR和巢式PCR技术扩增了一种新型环氧化物水解酶(PvEH3)的编码基因pveh3.借助表达载体pET-28a(+)将 pveh3 导入大肠杆菌 BL21(DE3)中进行了异源表达.一级和三级结构表明,PvEH3 属于 α/β水解酶超家族,其催化三联体为Asp101-His297-Asp262,两个保守质子供体为Tyr150和Tyr232.在20℃、pH7.0的反应条件下,PvEH3能催化环氧苯乙烷及其4种衍生物的对映会聚水解.实验结果表明,PvEH3对环氧苯乙烷及其对位取代环氧底物(93.2%、86.6%和85.1% eep)的对映会聚性优于其间位取代环氧底物(37.1%和53.3% ee p);Pv EH3针对5种环氧底物中的环氧苯乙烷具有最高的区域选择性,区域选择性系数αS和βR分别为93.9%和99.0%.Pv EH3的发现增加了区域选择性高且互补的EHs数目,为单酶催化环氧化物的对映会聚水解提供了更多的选择余地.
环氧化物水解酶、生物催化、表达、区域选择性、对映会聚水解
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Q556.9(酶)
国家自然科学基金项目21676117
2018-06-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共7页
1933-1939
