10.3964/j.issn.1000-0593(2023)07-2287-07
多光谱方法结合理论计算探究金属β-内酰胺酶SMB-1与亚胺培南之间的相互作用
金属β-内酰胺酶(MβLs)可以水解几乎所有的β-内酰胺类抗生素,这是导致细菌感染治疗中产生耐药性的主要机制.迄今为止,由于缺乏临床批准的抑制剂,这已成为全球关注的问题.最近来自粘质沙雷氏菌的 SMB-1 被发现是一种新型的 B3 亚类 MβL,它可以灭活几乎所有含β-内酰胺环的抗生素.为了明确SMB-1 与β-内酰胺类抗生素的特异性分子识别和作用机制,采用内源性荧光光谱、同步荧光光谱、三维荧光光谱及分子对接方法对碳青霉烯类抗生素亚胺培南(IMIP)与金属β-内酰胺酶 SMB-1 之间的相互作用机制进行探究.猝灭光谱结果表明IMIP可以使SMB-1 内源性荧光猝灭,且猝灭机制为动态和静态组合猝灭,其中静态猝灭为主,结合常数Ka 为 16.11×103 L·mol-1(277 K),表明两者之间具有很强的结合力;根据Van't Hoff方程得出结合过程中的热力学参数ΔG<0,ΔH=-79.65 kJ·mol-1,ΔS=-238.69 J·mol-1,说明两者的结合是由焓变和熵变共同驱动的,且氢键和范德华力为主要作用力;同步荧光结果中,随着IMIP浓度的增加,SMB-1 最大发射波长均发生蓝移 4.4 和 2.9 nm,表明 Tyr 和 Trp 残基参与 IMIP 与SMB-1 的结合过程;三维荧光光谱中 IMIP加入后,SMB-1 的Peak B和Peak C强度显著降低,表明 SMB-1与IMIP作用之后的微环境和构象发生了改变,与同步荧光结果一致.分子对接结果中 IMIP 的β-内酰胺环进入 SMB-1 的结合口袋,而侧链因空间位阻效应位于活性口袋的外部,表明 SMB-1 主要是识别 IMIP 的核心结构,与其 R2 侧链的作用较弱;与 IMIP 参与作用的氨基酸残基包括 Ser175,Thr177,Gln157,His215和 Glu217,表明这些氨基酸残基与活性部位的两个锌离子是设计具有强亲和力的 SMB-1 抑制剂的关键因素;结合自由能也为负值,表明两者的结合是一个自发放热的过程,与荧光结果一致.该研究提供了对SMB-1 与 IMIP的识别和结合的见解,可能有助于设计β-内酰胺酶新底物和开发对超级细菌具有抗性的新抗生素.
金属β-内酰胺酶 SMB-1、亚胺培南、荧光光谱、分子对接、相互作用
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TS201.2(食品工业)
国家自然科学基金;山西省基础研究计划项目
2023-07-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共7页
2287-2293
