10.3964/j.issn.1000-0593(2015)05-1335-05
超高压引发胰蛋白构象变化与酶活性间的关系
采用超高压技术处理胰蛋白酶，改变其空间结构，研究酶空间结构变化与酶活力之间的关系。采用傅立叶红外光谱（FTIR）检测超高压处理后胰蛋白酶的二级结构变化；采用荧光光谱检测处理后胰蛋白酶的三级结构；酶活力的检测采用福林酚法。结果显示，与未处理的相比，在37℃，不同压力（100～600 M Pa ）条件处理20 min ，对胰蛋白酶活力影响显著（p＜0.05）。其中，300 MPa处理，胰蛋白酶活力达到最大，较未处理的酶活提高了0.386倍。FTIR检测分析显示，300 MPa处理的胰蛋白酶，α-螺旋与β-转角的峰面积比值达到最大（2.749）；内源性荧光光谱检测结果显示，当激发波长为295 nm ，其荧光强度达到最高值（1353）；激发波长为280 nm ，其荧光强度达到最高（4262）；外源性荧光光谱结果显示，当激发波长为228 nm ，疏水氨基酸残基的荧光强度达到最高（2022）；上述荧光强度的变化较0.1 M Pa处理的胰蛋白酶均有显著差异（p＜0.05）。结论：超高压处理影响胰蛋白酶的空间结构及酶活性。其中，胰蛋白酶活性与α-螺旋和β-转角的峰面积的比值、色氨酸等疏水氨基酸及酪氨酸残基暴露程度有关。
超高压、胰蛋白酶、酶活力、红外光谱、荧光光谱
Q71(生物大分子的结构和功能)
国家自然科学基金项目31271841;天津市高等学校创新团队项目T D12-5049
2015-06-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共5页
1335-1339
