节瓜SCoT分析体系的建立与优化
为了获得适用于节瓜SCoT-PCR反应的反应体系以及适用于该体系的SCoT引物,首先利用正交实验的方法对节瓜SCoT-PCR反应体系的三因素(模板,2xsanTaq PCRmix预混液,引物)的工作浓度进行优化.然后利用优化的节瓜SCoT-PCR反应体系对36条SCoT引物进行筛选,首次筛选到应用于节瓜中的SCoT引物,并对部分引物的退火温度进行优化.通过分析,确定了节瓜SCoT-PCR反应体系是DNA模板(25 ng/μL)2.5 μL、2×SanTaq PCR mix 预混液 11 μL、引物(10 μmol/L)2μL,筛选到了 14条适合在节瓜的ISSR-PCR反应中应用的引物以及得到了它们的最适退火温度.与此同时,经验证该体系在节瓜应用具有良好的适用性、可靠性和稳定性.
节瓜、SCoT-PCR、正交设计、引物筛选、退火温度
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本研究由上海市科技兴农项目沪农科推字[2019]第1-12号和上海市崇明区农业科创项目2019CNKC-09
2021-07-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共8页
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