农杆菌介导的eGFP基因转化瓜叶菊技术体系的建立
为了建立稳定、高效的瓜叶菊遗传转化体系,本试验以瓜叶菊无菌苗茎段作为外植体,采用农杆菌EHA105介导法转化eGFP基因.探讨了不同菌液浓度,共培养时间,硫酸卡那霉素(Kan)和特美汀(Tim)浓度,乙酰丁香酮(AS)和表面活性剂Silwet L-77浓度,以及浸泡时间、超声波和真空渗入处理对外植体生长与转化率的影响.结果 表明:在瓜叶菊叶片中成功检测到eGFP基因的瞬时表达,农杆菌菌液DD600为1.0,共培养3d时最有利于农杆菌与外植体的融合生长;40 mg/L Kan和200mg/LTim可以分别作为有效的外植体筛选压和抑菌浓度;100 μmol/L AS和0.03% Silwet L-77能有效地诱导愈伤组织和提高转化率;浸泡30 min、超声波60 s和真空渗入30 s都能促进愈伤组织的形成及提高转化率.
农杆菌、eGFP基因、遗传转化、瓜叶菊
18
S565.1;S661.1;Q943.2
湖南省科技计划;湖南省科技厅重点项目;长沙市城市管理;行政执法局项目
2020-11-10(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共9页
6350-6358