华北蓝盆花ISSR-PCR引物筛选及反应体系优化
本研究以内蒙古自治区境内8个自然居群野生华北蓝盆花叶片作为供试材料,进行基因组总DNA的提取检测、ISSR引物筛选和引物退火温度的筛选.针对华北蓝盆花ISSR-PCR反应中的模板DNA浓度和引物浓度2个影响因素,在4个水平上对华北蓝盆花ISSR-PCR反应体系进行优化,确定最佳反应水平,最终建立华北蓝盆花ISSR-PCR扩增的最佳反应体系.结果 筛选出了8条多态性较好的华北蓝盆花ISSR引物及其退火温度,平均每条ISSR引物扩增出12.3条带,多态性条带占93.88％;华北蓝盆花ISSR-PCR反应的最佳体系为总体积20 μL,DNA模板1μL,DNA模板浓度为60 ng/μL,引物0.6 μL,引物浓度为0.8 μmol/L,Ex Taq DNA聚合酶10μL,ddH2O 8.4 μL,扩增程序为94℃预变性5 min;94℃变性0.5 min,不同引物最佳退火温度下退火1 min,72℃延伸1.5 min,35个循环;循环结束后72℃继续延伸7 min;4℃保存.本研究结果为进一步研究华北蓝盆花居群遗传多样性提供科学依据.
华北蓝盆花、ISSR-PCR、反应体系、引物筛选
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S634.03;S794.4;Q7
内蒙古自治区高等学校科学研究项目;内蒙古大学大学生创新创业训练计划;内蒙古大学大学生创新创业训练计划
2020-09-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共6页
5800-5805
