橡胶树MAPK同源蛋白HbNTF4的克隆、原核表达及纯化
植物有丝分裂原激活的蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)参与调控植物低温胁迫应答,但橡胶树中MAPK同源蛋白NTF4至今未被克隆与鉴定,克隆和研究HbNTF4的功能对橡胶耐寒品种的选育具有重要意义.本研究成功从橡胶树cDNA中克隆出HbNTF4基因,氨基酸序列分析表明Hb NTF4与其他物种序列同源性很高.通过qRT-PCR发现橡胶树4℃处理后HbNTF4基因表达量上升.将Hb NTF4构建至原核表达载体pET-28a上,在Escherichia coli BL21 (DE3)中诱导并成功纯化出HbNTF4重组蛋白.SDS-PAGE电泳检测表明HbNTF4在37℃诱导8h,IPTG浓度为0.2 mmol/L的条件下最优,最后成功纯化出符合预期大小的可溶性蛋白,为深入研究HbNTF4的生物学功能提供了理论依据.
巴西橡胶树(Hevea brasiliensis)、低温胁迫、MAPK、HbNTF4、蛋白纯化
18
S511;R73;R378.99
国家自然科学基金31560197
2020-09-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共7页
5622-5628
