彩叶芋SCoT反应体系的建立与优化
本试验通过单因子试验和正交试验的设计对”红桃K”彩叶芋的SCoT-PCR反应体系进行研究及优化.研究结果表明,彩叶芋SCoT最佳反应体系为(20 μL):引物浓度0.7 μmol/L,dNTPs (10 mmol/L)浓度0.5 mmol/L, Taq DNA 聚合酶 1.25 U, DNA 模板 80 ng, Mg2+ 浓度 1.5 mmol/L.PCR 扩增程序为:94℃预变性4 min,94℃变性45 s,50.4℃条件下退火45 s,72℃延伸90 s,35个循环后,72℃再延伸7 min,最后16℃保存.此外,利用市场上观赏价值较高的9个彩叶芋品种为材料,对确立的”红桃K”彩叶芋SCoT-PCR扩增体系进行再验证.结果表明,扩增条带清晰,重复后稳定性高,说明该反应体系为鉴定彩叶芋多样性合适的SCoT分子标记体系,同时为后期彩叶芋遗传多样性、分子辅助育种及遗传图谱的建立提供了依据.
彩叶芋、SCoT-PCR、单因子试验、正交设计
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中央高校基本科研业务费专项资金XDJK2016E140
2018-09-29(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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