红毛丹SRAP反应体系优化及多态性标记筛选
为建立成熟可靠的红毛丹SRAP-PCR扩增检测技术体系,本研究首先采用单因素实验设计,对反应体系中的DNA模板、Mg2+、dNTPs、Taq DNA聚合酶和引物浓度等5个主要影响因素,设置不同的水平梯度,筛选出适宜的因子范围;在此基础上,进一步采用L16(45)正交设计,建立了红毛丹SRAP-PCR最佳反应体系:20μL体系中包含DNA模板20 ng、dNTPs 0.25 mmol/L、引物0.6 μmol/L、rTaq酶1.0 U、Mg2+ 2.5 mmol/L.并利用优化的反应体系,从116对SRAP引物组合中筛选出37对扩增条带清晰、产物多态性较好的引物.本研究建立的SRAP-PCR体系及筛选的引物,将为红毛丹从分子水平进行种质资源遗传多样性分析、品种指纹图谱构建等研究提供基础.
红毛丹、SRAP、PCR
13
S682.31;S563.4;R284.1
海南省自然科学基金;基本科研业务费项目
2016-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
2604-2609