10.3969/j.issn.1672-416X.2004.01.002
DREB基因双T-DNA植物表达载体的构建及验证
W34基因经pGEM-T-EASY载体,克隆到pBDREB载体EcoRI位点,得到在Amp平板上生长的转化子pBW34-DREB质粒;质粒pBW34-DREB、pSPROK、pBlueks分别经PstI/KpnI、KpnI/EcoRI、PstI/EcoRI双酶切,三片段连接构建成中间表达载体pBWDTnos;再用SmaI/EcoRV双酶切pBWD-Tnos,将回收的DREB基因的完整的表达结构元插入到经SmaI酶切的质粒载体pCDMAR-Hyg中,构建成双T-DNA植物表达载体pCDMAR-pWDT-Hyg,大小为13.59kb,经酶切鉴定,证明构建的载体与预期设计的一致.将此双T载体用农杆菌介导法转化玉米胚性愈伤组织,期望得到无选择标记的安全的转基因植物.
DREB编码基因、中间载体、双T-DNA、植物表达载体、无选择标记
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Q94(植物学)
2004-03-05(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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