10.3969/j.issn.1008-0171.2008.02.012
奶牛胎儿细胞多位点基因打靶的研究
利用奶牛rDNA基因间的ITS重复序列作为靶位点.对奶牛胎儿成纤维细胞进行多位点基因打靶,建立以重复序列为靶位点的多位点基因打靶技术,并为克隆定点转基因奶牛提供核供体.首先分离培养出奶牛胎儿成纤维细胞,并进行性别鉴定和核型分析.采用MTT比色法确定了G418和GCV正负筛选的最低有效浓度.然后通过多位点基因打靶载体转染、正负筛选获得7个表达绿色荧光的克隆细胞系,经PCR,RT-PCR和测序证实其中1个细胞系为定点整合的克隆细胞系,且GFP基因表达.
奶牛、胎儿成纤维细胞、基因打靶、多位点、定点整合
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S823.91(家畜)
国家自然科学基金30671194;广东省自然科学基金04011645;广东省科技攻关计划2006B20101012
2008-06-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共6页
39-44
