10.3969/j.issn.1003-4331.2009.05.004
鸡致病性大肠杆菌O1、O2和O78I型菌毛结构基因的克隆、序列测定及同源性分析
提取鸡致病性大肠杆菌分离株O1、O2和O78的基因组DNA作模板,用TD-PCR技术从其中分别扩增出0.55 KB的I型菌毛结构基因(piliA).将扩增得到的piliA基因片段,用TA克隆的方法分别克隆进pGEM-T栽体中,转化至受体菌JM109中,用Amp/IPTG/X-gal琼脂平板蓝白菌落筛选法,得到舍阳性重组子的菌株,提取质粒用PstI单酶切及NcoI和PstI双酶切鉴定,结果证实,所构建的克隆质粒中均含有相应piliA基因.经DNA序列分析,其结构基因阅读框架大小为549 bp,但其中O1菌株Ⅰ型菌毛基因在第72位发生突变,有6个碱基插入.经DNAStar核酸分析软件分析,3个基因同源性为89.9%~92.0%.
鸡致病性大肠杆菌、I型菌毛、TA克隆、同源性
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S85;S8
2009-11-24(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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