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正交设计优化草地早熟禾SRAP-PCR反应体系及引物筛选

引用
采用L9(34)正交试验设计方法,对草地早熟禾(Poa pratensis)基因组DNA SRAP-PCR反应体系中的TaqDNA聚合酶、Mg2+、引物及dNTP四因素的用量进行优化,并比较不同模板DNA用量对扩增的影响,建立草地早熟禾SRAP-PCR最佳反应体系,同时,利用该体系对SRAP引物进行筛选。结果表明,草地早熟禾SRAP-PCR最佳反应体系为Taq DNA聚合酶1.0U、Mg2+1.75mmol.L-1、引物0.25μmol.L-1、dNTP 220μmol.L-1、40ng模板DNA、2μL 10×PCR buffer,总体积20μL。运用该体系从100对SRAP引物中筛选出43对引物能够产生清晰稳定的扩增条带且多态性丰富。优化体系的建立及引物的筛选可为今后利用SRAP标记技术对草地早熟禾进行遗传多样性分析、图谱构建、种质资源鉴定奠定技术基础。

草地早熟禾、SRAP标记、正交试验设计、引物筛选

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S688.4;Q945.79(观赏园艺(花卉和观赏树木))

基金项目:国家“十二五”支撑项目2011BAD17801

2012-06-02(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

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1001-0629

62-1069/S

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