10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2023.07.027
聚乙二醇在无蛋白酶稀释液中的应用
目的 酶稀释液是磁微粒化学发光试剂的关键组成成分之一,对酶标抗体或抗原的灵敏度、准确度和稳定性有显著影响.牛血清白蛋白(BSA)是酶稀释液中常用的保护蛋白,但由于它本身的性质和批间差等缺点不能完全满足试剂研发对性能的要求,因此对非BSA等天然蛋白替代品的寻找备受瞩目.方法 大量研究表明水溶性高分子聚合物聚乙二醇(PEG)是有效的抗非特异性吸附材料,在医疗、化妆、涂料等领域有广泛应用.在磁微粒化学发光平台,关于PEG酶稀释液无蛋白配方方面的应用很少被报道,因此本研究将酶稀释液中常用的BSA替换为了不同分子量的PEG,对多个项目的信噪比和稳定性进行了考核.结果 在信噪比方面,胰岛素样生长因子1(IGF-1)、糖类抗原72-4(CA72-4)、糖类抗原125(CA125)和促甲状腺激素(TSH)项目上不同分子量的PEG酶稀释液相对BSA酶稀释液都有很大提升,PEG1500在铁蛋白(Ferritin)项目中提升了信噪比,但戊型肝炎病毒抗体IgM(HEV-IgM)项目中无显著提升.Ferritin和HEV-IgM项目中PEG4000显著提升了信噪比,PEG6000无显著变化,PEG10000则显著降低了信噪比.在热加速稳定性上,IGF-1、CA72-4、CA125、TSH和Ferritin项目中,不同分子量PEG的酶结合物热稳定性都在10％以内,而HEV-IgM中,BSA酶结合物热加速后信号值下降32％,而PEG的酶结合物信号值下降只有7％～12％,PEG显著提升了酶标抗原的热稳定性.结论 在无蛋白酶稀释液中加入较低分子量的PEG,能够降低非特异性吸附,提升信噪比,增强酶标抗体或抗原的热稳定性,做到比BSA更优或同样的效果,而分子量过高的PEG可能有增加本底的风险.
酶稀释液、聚乙二醇、无蛋白、牛血清白蛋白
30
R-331(医学研究方法)
新发突发重大传染病检测国家工程研究中心项目
2023-11-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共5页
1220-1224
