10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2021.05.028
基于环介导等温扩增的志贺菌快速检测方法的建立
目的 建立基于环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术的志贺菌快速检测方法.方法 针对志贺菌特异保守ipaH基因设计引物,通过引物筛选和反应条件优化,建立检测志贺菌的实时荧光及肉眼目视观测结果的LAMP方法,对方法的检出限、有无交叉反应、符合率和抗干扰能力进行评价.结果 60~65℃等温条件下30min内可完成LAMP反应.荧光和肉眼目视观察结果检出限分别为211和21.1 fg/μL,与22种非志贺菌无交叉反应.检测35份志贺菌污染的样品和30份未污染标品,荧光和肉眼目视检测阳性符合率分别为97.1%和94.3%,阴性符合率均为100%,总符合率分别为98.5%和96.9%.方法 具备良好的抗干扰能力.结论 在基层医院、灾区救治、感染事件现场,环境、设备和人员受限等条件下,建立的实时荧光和肉眼目视观察结果的LAMP方法可为志贺菌快速检测提供有力手段.
环介导等温扩增、志贺菌、快速检测
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R-331(医学研究方法)
全军医学科技青年培育计划课题16QNP030
2021-06-23(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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