10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2014.04.035
一对高亲和力抗人肌钙蛋白Ⅰ单克隆抗体的制备及鉴定
目的 获取抗人肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)的单克隆抗体(McAb).方法 以人cTnI作为抗原,免疫Balb/c小鼠,通过杂交瘤技术制备了抗人cTnI高亲和力、高特异性单克隆抗体.随后采用间接ELISA法测定抗血清效价,用protein G亲和纯化法纯化抗体,抗原竞争ELISA法鉴定抗体亲和力,SDS-PAGE法鉴定纯度,Western blotting鉴定抗cTnI单克隆抗体的特异性,竞争ELISA法分析抗原结合位点.结果 筛选出9株稳定分泌抗cTnI的单抗杂交瘤细胞株,其中A3、A9两株免疫球蛋白亚类均为IgG2a,分泌的抗体纯度高,与CK-MB、cTnT无交叉反应,效价均为:1:1024000,亲和力分别为4.21×108mol/L、1.07×108mol/L,抗原结合位点不同.结论 成功制备出了一对高亲和力、高特异性抗人cTnI单克隆抗体.
人肌钙蛋白Ⅰ、单克隆抗体、亲和力、特异性
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R56;R54
国家高技术研究发展计划863计划资助项目2011AA02A111
2014-09-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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