10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2013.01.014
小鼠胚胎成纤维细胞的原代培养及饲养层制备
目的 建立小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)饲养层,用于胚胎干细胞的培养.方法 取孕13～ 15d的昆明种小鼠,分离原代成纤维细胞,在37℃时,用0.25％胰蛋白酶(含0.04％ EDTA)消化组织块5min,重复消化多次,24h首次换液,培养3d后传代.采用10μg/mL丝裂霉素C处理胚胎成纤维细胞3h,制备出的饲养层细胞能有效地抑制胚胎干细胞的分裂,且不影响其活力.结果 胎鼠分离原代成纤维细胞经10μg/mL丝裂霉素C处理后,细胞仍保持分泌多种生长因子的能力,在10d内既不增殖,也不死亡,能够很好的维持胚胎干细胞克隆的生长.结论 该方法制备的饲养细胞层适用于胚胎干细胞的培养.
小鼠胚胎成纤维细胞、丝裂霉素C、饲养层、胚胎干细胞
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Q-34(生物科学的研究方法与技术)
国家自然科学基金项目81100118,30740026;高校博士点基金新教师类项目20101106120007
2013-03-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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