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Tamm-Horsfall蛋白片段的基因克隆、表达、纯化及抗原性鉴定

引用
目的 克隆并表达尿调节素(Tamm-Horsfall,THP)蛋白片段的基因,检测其抗原性.方法 利用RT-PCR技术扩增THP蛋白片段基因,测序后将目的基因克隆入原核表达质粒pET28a载体,转化至大场杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达,获得重组THP蛋白片段.经NI亲和层析柱纯化,用western-blot检测重组蛋白与THP单克隆抗体结合活性.结果 克隆THP蛋白片段基因,其开放阅读框为195 bp编码65个氨基酸.表达的重组THP蛋白片段以包涵体形式存在,菌体蛋白纯化后,经western-blot检测具有较好的抗原性.结论 成功地克隆和表达了THP片段的基因,为抗THP单克隆抗体制备和THP检测试剂盒的研发奠定了基础.

Tamm-Horsfall蛋白、基因克隆、表达、抗原性

19

Q78(基因工程(遗传工程))

首都医学发展基金2009-2056

2013-01-22(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

共4页

360-363

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