10.3969/j.issn.1006-1703.2010.02.011
小鼠Hsp27基因siRNA重组腺病毒载体的构建与鉴定
Hsp27是小分子量热休克蛋白亚家族的重要成员之一,主要参与细胞内蛋白质的折叠、抗凋亡、甾体激素合成、氧化应激及信号通路等生理过程.为进一步研究其生理与病理生理功能,本文构建了针对小鼠Hsp27基因的小分子干扰RNA(siRNA)重组腺病毒载体,并在AD-293细胞中与Hsp27超表达载体共同转染,观察其对Hsp27表达的影响.根据siRNA靶序列的设计要求,设计并合成针对小鼠Hsp27的siRNA靶DNA序列,克隆至穿梭载体pShuttle-H1中,与腺病毒骨架质粒pAdeasy-1在BJ5183细菌中进行同源重组,转染AD-293细胞,包装得到含siHsp27的重组腺病毒,在体外与Hsp27超表达载体共转AD-293细胞.通过酶切鉴定、序列测定和Western blot鉴定,确定小鼠Hsp27 siRNA重组腺病毒载体构建成功,且该重组腺病毒能降低67%的Hsp27蛋白表达.本文构建的针对小鼠Hsp27基因的siRNA重组腺病毒载体,为进一步研究Hsp27基因的功能奠定了基础.
Hsp27、siRNA、腺病毒、多囊卵巢综合征
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Q782(基因工程（遗传工程）)
国家自然科学基金30800394和30801236;江苏省医学重点学科LJ200606和XK200702
2010-05-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共5页
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