10.3969/j.issn.1006-1703.2001.02.010
人脂皮素-1重组蛋白的表达与鉴定
为了获得有免疫原性的人脂皮素-1(lipocortin-1,LC-1)蛋白,以便疫动物获得抗体,建立了免疫分析方法,而且更深入地探讨LC-1抗炎机制及其在临床上的应用.采用基因工程的方法进行重组人LC-1的原核表达并鉴定,主要结果如下:(1)从U937细胞中提取总RNA,以此为模板行反转录PCR,成功地扩增了1038bp的人LC-1cDNA基因,并将此基因全长克隆入pUC18载体,经测序分析证实克隆序列与文献报道的序列基本一致;(2)成功地构建了原核表达质粒pBV220/LC-1,并在大肠杆菌中实现表达.经SDS-PAGE电泳和Western免疫印迹分析,证实重组菌产生37kD的表达产物,且此蛋白可与LC-1抗体特异结合.实现了人LC-1基因的克隆及原核表达,获得了有免疫学活性的LC-1,为LC-1的基础研究和临床应用奠定了基础.
脂皮素-1、反转录聚合酶链反应、克隆、原核表达、聚丙烯酰胺凝胶电泳、免疫印迹分析
8
R318(医用一般科学)
2004-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共6页
84-89